孙佳姝课题组
孙佳姝课题组
课题组在基于DNA纳米笼的细胞外囊泡miRNA高选择性热泳测量领域研究成果发表于Angew. Chem. Int. Ed.
近日，课题组与湖南大学柯国梁教授等人合作，发展了一种基于DNA纳米笼的热泳检测新方法，实现了临床血清样本中囊泡miRNA成熟体的高灵敏、高选择性、原位测量（Angew. Chem. Int. Ed, 2023, 62, 202303121）。该方法首先设计具有尺寸选择性的DNA纳米笼，用于miRNA成熟体的特异性识别。将DNA纳米笼与囊泡共孵育后，囊泡内尺寸较小的miRNA成熟体可以进入纳米笼并在识别后产生荧光信号，同时，尺寸较大的miRNA前体无法进入纳米笼。随后，将囊泡样本与聚乙二醇混合后进行近红外激光照射，在激光介导的温度梯度和聚乙二醇浓度梯度共同作用下，囊泡快速富集并放大其中纳米笼的荧光信号；通过分析热泳汇聚位置处的荧光信号强度，即可实现囊泡miRNA成熟体的高灵敏测量。
作者利用该方法对细胞系分泌的囊泡进行了分析。结果显示，该方法可以特异性检测囊泡所携带的miRNA成熟体，且不受miRNA前体及游离miRNA干扰；对不同乳腺癌细胞系囊泡中miR-21成熟体的检测结果与PCR一致，检测限达到2.05 fM。该方法可直接应用于临床乳腺癌血清样本囊泡miRNA的分子图谱测量，无需囊泡分离纯化等复杂前处理。结果显示，基于DNA纳米笼的血清囊泡miRNA图谱可以有效区分乳腺癌患者与健康对照者，曲线下面积为0.92，准确率为90%，区分效果显著优于传统的分子探针。
本工作受到国家自然科学基金委、国家重点研发计划、中国科学院、湖南省自然科学基金以及中国博士后科学基金会等的资助。
文章链接：https://doi.org/10.1002/ange.202303121.
